• Il faut avoir mis au point une méthode HPLC avant d’envisager des mesures par LCHRMS.
• Les éluants possibles pour adapter une méthode HPLC/UHPLC  à une méthode LCHRMS, sont : Acétonitrile, Méthanol, H₂O + acide formique 0.1%, H₂O + acétate d’ammonium. (La phase idéale : H₂O + acide formique 0.1% / ACN).
• Les rampes de gradients sont à adapter aux molécules recherchées en cocktail et leur affinité pour une séparation optimale.
• Pour des mélanges complexes privilégier l’UHPLC.

⚠️  : Pas d’acides fort, pas de sels non volatiles du type phosphate, échantillons filtrés au minimum à 0.45 µm.

• Les solutions analysées sont filtrées et dans une matrice aqueuse.
• Possibilité d’analyser simultanément les anions et les cations avec une détection conductimétrique. (Acides organiques, ions inorganiques)
• Les éluants sont : de l’hydroxyde de potassium pour l’analyses des anions et de l’acide méthane sulfonique pour l’analyse des cations.
• Le couplage à la masse se fait soit avec la ligne anion soit avec la ligne cation.

⚠️ : Impossible d’analyser des ions métalliques et des échantillons en solvants organiques.

Analyse qualitative :  MS Orbitrap (ENSIACET)

• Détection de molécules ionisables en mode positif (ex : [M+H]⁺, …) ou
  négatif (ex : [M-H]^–, …).
• Identification : détermination de masse moléculaire et composition élémentaire (formule brute).
• Mode d’acquisition : Full scan (balayage complet de masse, le mode « ion ciblé » comme avec un quadripôle est impossible !)
• Dans une matrice « simple » : possibilité d’avoir les spectres de fragmentation en vue de déterminer la structure de la molécule (formule développée).
• Possibilité de faire des analyses en introduction directe (infusion) pour des composés purs, sans passer par l’HPLC.

Analyse qualitative et quantitative : MS Q-Orbitrap (Bat. 2R1 – UT3)

• Mêmes possibilités qu’avec le spectromètre situé à l’ENSIACET.
• Quantification : dépend de la molécule, il est nécessaire d’utiliser un standard si possible certifié et / ou marqué par exemple de type ¹³C, pour s’affranchir des effets matrices et des variabilités machine.
• Gamme étalon avec un standard de la molécule cible, si possible un étalon marqué ¹³C en plus.
• Bonnes performances : système hybride MS/MS possibilité de travailler en SIM (single ion monitoring) ou PRM (Parallel Reaction Monitoring) mais également en Full Scan avec confirmation via la MS/MS.
• Domaine de linéarité, environ 2 décades, molécule et matrice dépendant.
• Limite de quantification moyenne « machine » : 50-100 ng/L – selon la matrice et le traitement extraction/concentration préalable de l’échantillon qui ne sera pas réalisé par le pôle, sachant que c’est molécule dépendante.

⚠️ : Une bonne connaissance de la matrice de l’échantillon est obligatoire, car tout ne s’injecte pas en en spectrométrie de masse.